[의학,약학] [미생물학 experiment(실험)] 세포로부터의 DNA 분리, 정제
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작성일 24-07-24 11:18
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예외적으로 대장균(E. coli) 세포로부터 M13의 dsRF를 분리할 때는 플라스미드 분리 때와 같은 방법이 사용된다
3.1 Total cell DNA의 분리
세균 세포의 배양물로부터 total DNA를 준비하는 방법은 4 단계로 나눌 수 있다
①세포배양액 - 증식, 수확(원심분리 이용)
②세포파괴 - 내용물 방출
③DNA만 분리 - 단백질 제거(페놀 처리), RNA제거(Rnase 처리)
④DNA 농축 - 2 vol.의 에탄올(EtOH) 처리
…(省略)
실험과제/생물의학
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식물과 대장균의 genomic DNA 분리,추출의 차이점
생세포로부터의 DNA 분리, 정제
유전 工學(공학) 을 위한 DNA분리는 3가지 유형으로 구분할 수 있다
1. 제 1 타입은 세포 전체 DNA(total cell DNA)이며 클로닝될 유전자를 얻기 위해 필요.
2. 제 2 타입은 순수한 플라스미드 DNA이며 분리방법은 기본적으로 total cell DNA분리와 같지만 어느 단계에서는 염색체 DNA와 분리되어야 한다.
3. 제 3 타입은 파지 DNA이 며 파지 클로닝 벡터로 이용될 때 필요. 파지 DNA는 감염세포로부터 보다는 파지 자체에서 분리되는 것이 일반적이기 때문에 세균 DNA에 의해 오염되는 문제는 없다. 그러나 파지 캡시드(단백질)를 제거하기 위해선 특수한 방법이 필요하다.
