[online]생화학 - pH에 따른 Lipase의 분해도 측정(測定)
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작성일 23-04-15 21:20
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그리고, pH6에서값들이 일정하지 않음이 보이는데, 이는 거의 反應이 일어나지 않아 생성된 P-NP의 양이 적어 다른 외부요인(cuvette을 씻을때의 남은 증류수로 인한 농도change(변화))의 영향으로 농도change(변화)가 생겨 발생하였을 수 있다. 또, 모든 효소가 마찬가지이겠지만, Lipase도 어디에서 유래되었냐에 따라 최적 pH가 다르지만 實驗(실험)결과 우리가 사용한 Lipase는 pH 6,7,8중에서 8에서 가장 활성화되었다.
이번 實驗(실험)에서는 지난번 實驗(실험)과는 달리 Lipase solution형태로 넣은게 아니라 Lipase bead를 넣어 측정(measurement)할때의 효소의 영향을 줄여 잔여효소에 의한 實驗(실험)의 오차를 줄일수 있게 되었다. 하지만 더 정확한 최적 pH를 알기 위해서는 pH8보다 더 높은 pH에서 값을 측정(measurement)해야한다.
2. 실험목적
효소인 Lipase는 pH, 온도등에 요인에 따라 활성도의 차이가 있다아 그중 pH에 따른 Lipase의 활성도를 측정(測定) 하고, 그중 가장 optimal한 pH를 알아본다. 그중 pH에 따른 Lipase의 활성도를 측정하고, 그중 가장 optimal한 pH를 알아본다.
3) 각각의 sample을 10분, 20분, 30분, 40분 에 500μl씩 취한 후 각각의 pH에 맞는 phosphate buffer 500μl씩 넣어 총 12개의 1ml의 sample을 만든다.
1. 실험제목 : pH에 따른 Lipase의 분해도 측정(測定)
1) Phosphate buffer의 pH에 따라 Phosphate buffer 9500μl, p-NPB 300μl, Lipase bead 1ea를 넣어 3개의 sample을 만든다.
순서
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1. 실험제목 : pH에 따른 Lipase의 분해도 측정 2. 실험목적 효소인 Lipase는 pH, 온도등에 요인에 따라 활성도의 차이가 있다. 3. 기구 및 시약 - 기구 : 마이크로피펫, PCR-tube, spectrophotometer, cuvette, incubator, 원심분리기 - 시약 : Phosphate buffer (pH6, 7, 8), Lipase bead 3개, P-Nitrophenol butyrate(P-NPB
설명
생화학,pH에 따른 Lipase의 분해도 측정, Lipase의 분해도
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4) pH에 따라 sample의 OD값을 측정(measurement)하고 그래프를 그린다.
- 시약 : Phosphate buffer (pH6, 7, 8), Lipase bead 3개, P-Nitrophenol butyrate(P-NPB
2) 위의 3개의 sample을 incubator 25°C에서 反應시킨다.
- 기구 : 마이크로피펫, PCR-tube, spectrophotometer, cuvette, incubator, 원심분리기
생화학 - pH에 따른 Lipase의 분해도 측정(測定)
3. 기구 및 시약
다.
